实验方法原理

弹力纤维由随机交联的肽链组成，富含二硫键糖蛋白，因此被称为弹性蛋白。这种结构使其易于与染色液中的碱基结合。为了更直观地显示弹力纤维和胶原纤维的成分，我们采用了维多利亚蓝、丽春红及ku味酸的组合双重染色方法。

实验材料

所用材料包括石蜡组织切片、试剂盒、维多利亚蓝、糊精、间苯2酚、蒸馏水、乙醇、三氯化铁水溶液、浓盐酸、苯/酚、二甲苯及中性树胶。实验中还使用了60℃恒温箱和滤纸等耗材。

实验步骤

维多利亚蓝染色液的制备：将2g维多利亚蓝、0.5g糊精和4g间苯2酚混合后，加200ml蒸馏水加热煮沸并搅拌约5分钟。接着，取25ml的30％三氯化铁水溶液，另行加热后缓慢倒入混合液中，继续煮沸3分钟，直至液体呈胶冻状。去火后冷却过滤，将滤纸上的残渣放入60℃恒温箱中烘干。最后将干燥的深蓝色颗粒状粉末溶解于400ml的70％乙醇中，并加入4ml浓盐酸和5g苯/酚，静置成熟后备用。

切片处理步骤：

1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。
2. 将切片在70％乙醇中洗涤2分钟。
3. 切片浸入维多利亚蓝液中染色2至5小时。
4. 直接进入95％乙醇中进行分色，时间为数秒。
5. 用蒸馏水冲洗2分钟。
6. 使用丽春红-ku味酸染色液滴染切片3分钟。
7. 用无水乙醇冲洗超量染色液两次。
8. 用二甲苯透明和中性树胶封固切片。

注意事项：

维多利亚蓝染色液在室温下可保存较长时间，染色后可以重复使用。经过95％乙醇分色后，务必立即浸入水中，以便用显微镜观察染色程度。如染色不均匀可以重复染色或分色。观察结果显示，弹力纤维呈蓝绿色，胶原纤维则为红色，背景呈黄色。

尊龙凯时专业致力于生物医疗领域的研究，我们提供高品质的实验材料和设备，帮助您在各类生物实验中获得最佳结果。遵循严格的实验流程和安全指南，让您在探索生命科学的旅程中更加安心。