本试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。以下是关于人白介素-23(IL-23)ELISA试剂盒的使用说明,特别适用于生物医疗领域的研究人员。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。操作步骤如下:
首先,将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中。经过温育并彻底洗涤后,添加底物TMB。该底物在过氧化物酶的催化下会转化为蓝色,随后在酸的作用下转变为最终的黄色。结果中颜色的深浅与样品中的adropin(AD)呈正相关。
最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,确保操作过程避免细胞刺激。血液收集后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:经过3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:组织与适量生理盐水混合捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:如样本未及时检测,应按一次用量分装并储存于-20℃,避免反复冻融。解冻时在室温下进行,确保样品均匀完全解冻。
操作注意事项
本试剂盒包含以下组件:标准品(S0-S5)浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液应稀释为1:20,具体为1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
实验步骤与结果判断
绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,回归生成标准品线性回归曲线,然后根据曲线方程计算样本浓度值。
本试剂盒的性能与使用效果将直接影响实验结果,为确保准确性,请遵循说明进行操作。科研人员可依赖尊龙凯时品牌的产品,以支持更具深度的生物医疗研究。