一、用途及原理
该培养基专为选择性增菌培养大肠埃希氏O157菌而设计,符合FDA的标准。培养基中含有蛋白胨、酪蛋白水解物和酵母浸粉,提供细菌所需的基本营养成分。同时,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾用于保持培养基pH的相对稳定性。乳糖和丙酮酸钠作为碳源,能有效促进大肠埃希氏O157菌的生长。此外,吖啶黄素、万古霉素和头孢磺啶的添加可抑制大多数革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌的繁殖,确保培养的特异性。二、培养基配方(g/L)
- 蛋白胨: 100
- 氯化钠: 50
- 磷酸氢二钠: 36
- 磷酸二氢钾: 15
- 酪蛋白水解物: 50
- 乳糖: 100
- 丙酮酸钠: 10
- 酵母浸粉: 60
- 吖啶黄素: 0.01
- 万古霉素: 0.008
- 头孢磺啶: 0.01
pH值维持在72±0.2。
三、配制方法
量取本品421克,溶解于1000毫升蒸馏水中,分装为每瓶225毫升。进行121℃高压灭菌15分钟,冷却后备用。随后将25克样品加入225毫升培养基中并充分混匀,置于37±1℃条件下培养5小时。之后,将一支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素225毫克,万古霉素18毫克)和一支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶225毫克)加入培养基中,转置于42±1℃下培养18-24小时。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株于36±1℃下培养18-24小时,观察生长现象如下:
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量/CFU | 生长现象 |
---|---|---|---|
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 10-100 | 浑浊 |
鼠伤寒沙门氏菌 | ATCC14028 | 10-100 | 浑浊 |
大肠埃希氏O157菌 | ATCC35150 | 10-100 | 浑浊 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC25923 | 1000-5000 | 不生长 |
铜绿假单胞菌 | ATCC27853 | 1000-5000 | 不生长 |
mBPWp培养基试验现象显示(从左至右依次为大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏O157菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)。
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